核酸凝膠染料使用中需要注意的一些問題
核酸凝膠染料是目前市場中靈敏的凝膠核酸染料
穩(wěn)定性*
可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存
更安全
試驗結(jié)果表明,該染料的誘變性遠小于溴化乙錠(EB)
廣泛的適應性
適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色
核酸凝膠染料染色過程簡單
與EB一樣,在預制膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗
對DNA和RNA的遷移影響極小
對核酸遷移的影響小
核酸凝膠染料注意事項:
(1)此方法染色染料用量相對較少。500μL染料大約可以做100塊50mL的膠。
(2)由于SolargelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將SolargelRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。gelred兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
(3)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
(4)此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。