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Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G
生物發(fā)光反應(yīng)
幾個因素將會影響反應(yīng)的靈敏度,包括溫度,pH或底物濃度。為得到*結(jié)果,在使用之前我們建議用pH7.8的緩沖液,并且所有試劑在室溫下預(yù)熱。為充分反應(yīng),我們建議在分析緩沖液中加入過量的ATP和Mg2+。
當(dāng)熒光素加入到熒光素酶樣品中,會看到瞬間閃光在0.3-0.5秒內(nèi)達(dá)到峰值強度。這光將隨著半衰期0.5-1.0分鐘左右很快消失。但是初始如果在分析buffer中加入輔酶A,將能阻止快速反應(yīng)延長半衰期至2-5分鐘。如果在反應(yīng)混合液中后加輔酶A,將促進(jìn)額外的,次級發(fā)光(Fraga, 2008)。
在Gold Bio,我們建議用以Yuichi Oba, et al. (2003)為基礎(chǔ)的熒光素酶分析buffers:
-100mM Tris- HCl(pH7.8)
-5mM MgCl2
-250 uM CoA
-150 uM ATP(Fraga, 2008)
-150 ug/ml d-Luciferin
一些研究者在分析buffer中也加入其它成份,比如DTT或EDTA(Steghans, 1998)。根據(jù)您具體需要可以適當(dāng)調(diào)整分析buffer。為得到zuijia結(jié)果,根據(jù)您具體細(xì)胞我們建議先做一個動力學(xué)曲線的初步測試。
產(chǎn)品具體信息
D-熒光素鉀鹽
4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt
KC11H7N2O3S2
分子量:318.42 g/mol
D-熒光素鈉鹽
4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt
NaC11H7N2O3S2.H2O
分子量:320.32 g/mol
儲存:-20℃避光保存。
Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G
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